產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 其他 |
ChainFree? Anti-Flag Magnetic Beads | FI8201-0.5mL | |
ChainFree? Anti-Flag Magnetic Beads | FI8201-1 mL | |
ChainFree? Anti-Flag Magnetic Beads | FI8201-5 mL |
ChainFree? Anti-Flag磁珠(Anti-DYKDDDDK 磁珠)偶聯(lián)了經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選、優(yōu)化并重組表達(dá)的無(wú)輕、重鏈的Flag抗體,可用于捕獲哺乳動(dòng)物、植物、細(xì)菌、酵母、昆蟲等多種生物細(xì)胞、組織提取物中的Flag標(biāo)簽(DYKDDDDK)融合蛋白及其相互作用蛋白,且IP洗脫產(chǎn)物中沒(méi)有抗體輕、重鏈污染。
鏈霉親和素磁珠 | 2 μm |
儲(chǔ)存緩沖液 | 20 mM PBS,5% BSA |
反應(yīng)性 | 可特異性結(jié)合1×或3×Flag標(biāo)簽(DYKDDDDK),對(duì)融合蛋白N端、C端或中間的Flag標(biāo)簽均可以識(shí)別 |
保存和運(yùn)輸 | 4℃保存1年(避免凍存),冰袋運(yùn)輸 |
免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(CoIP)、染色質(zhì)免疫沉淀(CHIP)、RNA 結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)
無(wú)抗體輕重鏈污染 IP復(fù)合物無(wú)論采用非變性洗脫還是變性洗脫 均不會(huì)出現(xiàn)抗體的輕、重鏈污染問(wèn)題 | 親和力強(qiáng) 低nM級(jí)別親和力 輕松應(yīng)對(duì)低拷貝基因,或難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系 | 結(jié)合量高 采用定向偶聯(lián)技術(shù) 每10 μL抗體磁珠可結(jié)合約15 μg重組蛋白 |
特異性強(qiáng) 抗體磁珠通過(guò)了10株以上的空白細(xì)胞系檢測(cè) 不易產(chǎn)生非特異吸附 | 兼容性好 無(wú)論標(biāo)簽在誘餌蛋白的N端或C端 都可識(shí)別 | 穩(wěn)定性好 通過(guò)了45℃高溫測(cè)試 輕松應(yīng)對(duì)物流失溫,實(shí)驗(yàn)后忘記放冰箱等情況 |
●Western-Blot結(jié)果顯示:輝駿生物ChainFree?磁珠對(duì)誘餌蛋白的親和力強(qiáng),IP效果與sigma產(chǎn)品相當(dāng),且遠(yuǎn)高于同類知名品牌磁珠。
●SDS-PAGE結(jié)果顯示:輝駿生物ChainFree?磁珠的IP復(fù)合物中無(wú)抗體輕重鏈污染,并且同等使用體積時(shí)拉取到的誘餌蛋白和互作蛋白量更高,更有利于后續(xù)質(zhì)譜檢測(cè)需求。
Tips:雖然采用偶聯(lián)HRP的anti-flag抗體或輕重鏈特異性二抗做WB實(shí)驗(yàn)可以掩蓋輕重鏈干擾問(wèn)題,但I(xiàn)P復(fù)合物中的輕重鏈污染依舊存在,且會(huì)對(duì)質(zhì)譜檢測(cè)造成影響。
泳道1:轉(zhuǎn)染Flag空載體的HEK-293T細(xì)胞裂解液
泳道2:轉(zhuǎn)染Flag-誘餌蛋白的HEK-293T細(xì)胞裂解液
泳道3:轉(zhuǎn)染Flag空載體的HEK-293T細(xì)胞裂解液采用20 μL ChainFree? Anti-Flag 磁珠IP后的洗脫液
泳道4:轉(zhuǎn)染Flag-誘餌蛋白的HEK-293T細(xì)胞裂解液采用20 μL ChainFree? Anti-Flag 磁珠IP后的洗脫液
一抗:Anti-Flag小鼠單克隆抗體1:2500稀釋(輝駿產(chǎn)品貨號(hào):FI01104)
二抗:羊抗鼠IgG (H+L) :1:8000稀釋
預(yù)計(jì)分子量大?。?5 kDa
● ChainFree? Anti-HA Magnetic Beads(FI8202)
● ChainFree? Anti-V5 Magnetic Beads(FI8203)
● ChainFree? Anti-Myc Magnetic Beads(FI8204)
● ChainFree? Anti-GFP Magnetic Beads(FI8205)
● ChainFree? Anti-mCherry Magnetic Beads(FI8206)
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